مقایسه روش های pcr-rflp ، مستقیم میکروسکوپی و کشتnnn در تشخیص لیشمانیوز جلدی
چکیده
چکیده زمینه و هدف: لیشمانیوز، بیماری عفونی انگلی با انتشار وسیع در مناطق معتدله و گرمسیری است. با توجه به اینکه ارتقاء روش های تشخیص صحیح و سریع cl (cutaneous leishmaniasis) نقش به سزایی در کاهش عوارض بیماری به خصوص پیشگیری از بروز اسکارهای وسیع دارد، هدف از این مطالعه ارزیابی روش pcr-rflp با پرایمرهای itsrl و l5.8sدر مقایسه با روش های مستقیم میکروسکوپی و کشت nnn برای تشخیص cl می باشد. مواد و روش کار: در این مطالعه از بین افراد دارای ضایعه ی جلدی مشکوک به cl،60 بیمار با leishmanin skin test (lst) مثبت انتخاب و از هر کدام سه نمونه جهت بررسی میکروسکوپی، کشت در محیط nnn وpcr–rflp تهیه گردید. لام های رنگ آمیزی شده با لنز روغنی×100 جهت مشاهده اشکال اماستیگوت انگل آزمایش شد. جهت کشت مقداری از مواد برداشت شده از حاشیه ضایعه بیمار به محیط nnn ، انتقال داده شد. پس از استخراجdna با استفاده از روش pcr-rflp تکثیر از توالی its1 با پرایمرهای اختصاصی صورت گرفت و بعد از هضم باآنزیم haeiii ایزوله ها درمقایسه با سویه های استاندارد تعیین گونه شد. داده ها با استفاده از آمار توصیفی و تست حساسیت با استفاده از نرم افزار spss15 مورد تجزیه وتحلیل قرار گرفت. یافته ها: روش میکروسکوپی در 36 مورد از 60 بیمار (%60) و نتایج کشت نمونه ها در محیط nnn در 37 مورد (%62) مثبت شد. در روش pcr-rflp 55 مورد (%91)، با این روش مثبت و تعیین گونه شد. نتیجه گیری: با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه و امکان تشخیص گونه ها با روش pcr-rflp، فراهم نمودن امکانات استفاده از این تکنیک، همراه با روش مستقیم میکروسکوپی و کشت nnn در موارد لازم، در مراکز درمانی پیشنهاد می گردد.