همسانه سازی، امتزاج و بررسی بیان دومن -a۱ آنتی ژن حفاظتی (pa۲۰) باسیلوس آنتراسیس و n- ترمینال ipad شیگلا در اشرشیا کلی
چکیده
زمینه و هدف: جنس شیگلا یکی از عوامل اصلی بیماری اسهال در انسان و باسیلوس آنتراسیس عامل سیاه زخم (یک بیماری مشترک بین انسان و دام) می باشد. یکی از مهم ترین فاکتورهای بیماریزایی شیگلا، پروتئین ipad است. همسانه سازی n ترمینال ژن ipad به همراه ژن pa20 که دارای نقش ایمنی زایی است، به عنوان کاندید واکسن نوترکیب می تواند مطرح باشد. در این مطالعه بیان ژن ممزوجی دومن -a1 آنتی ژن حفاظتی (pa20) باسیلوس آنتراسیس و n- ترمینال ipad شیگلا در اشرشیاکلی بررسی شد. روش بررسی : در این مطالعه تجربی، طراحی پرایمر برای ژن pa20 صورت گرفت و جهت تکثیر این قطعه، واکنش pcr انجام شد. سپس قطعه تکثیرشده به درون pgem-t easy vector systems همسانه سازی شد. ژن pa20 به وسیله آنزیم های محدودالاثر ecori و xhoi برش خورده و در نهایت، ژن pa20 به ژن ipad ممزوج شد. وکتور pet28a(+) حاوی کاست ژنی ipad-pa20 ساخته شده به باکتری e. coli سویه bl21(de3) تراریخت و بررسی بیان کاست ژنی انجام گرفت. یافته ها: در این مطالعه، ژن های ممزوجی ipad-pa20 در وکتور بیانی pet28a(+) به وسیله pcr و هضم آنزیمی تأیید گردید. همچنین پروتئین نوترکیب تولیدشده به وسیله sds-page و لکه گذاری وسترن تأیید شد. نتیجه گیری: با توجه به شناسایی آنتی ژن pa به وسیله آنتی بادی pa20 و خاصیت القای آپاپتوز آن و خاصیت ایمنی زایی آنتی ژن ipad تولیدشده، به عنوان کاندید واکسن نوترکیب علیه انواع شیگلا و باسیلوس آنتراسیس می تواند مطرح باشد.