طراحی روش بررسی اتصال سلولی پروتئین ها بر پایه الایزا قابل استفاده در ژن درمانی برون ت
ابراهیم حسینی، e hosseini department of molecular genetics, tarbiat modares university, tehran, iran,گروه ژنتیک مولکولی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران، سیدیونس حسینی، sy hosseini department of bacteriology and virology, shiraz university of medical sciences, shiraz, iranگروه ویروس شناسی و باکتری شناسی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران طیبه هاشم پور، t hashempour department of medical virology, alborzi clinical microbiology research center, namazi hospital, shiraz university of medical sciences, shiraz, iran,مرکز تحقیقات عفونی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران، محمدرضا فتاحی، mr fattahi gastroenterohepatology research center (gehrc), shiraz university of medical sciences, shiraz, iranمرکز تحقیقات کبد و گوارش، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران مجید صادقی زاده، m sadeghizadeh department of molecular genetics, tarbiat modares university, tehran, iran,گروه ژنتیک مولکولی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران،
چکیده
زمینه و هدف: یکی از راهکارهای بهبود ژن درمانی، هدفمند کردن ژن، درمانگر میباشد. افزودن توالیهای کد کننده پپتیدها و یا پروتئینهای با گرایش بالا به سلولهای هدف ژن درمانگر کد کننده پروتئین ترشحی، از جمله این روشها محسوب میشود. با این وجود ارزیابی کارآمدی چنین تغییراتی در هدفمندسازی محصول ژن با روشهای معمول بررسی اتصال سلولی پروتئینهای درمانگر تولید شده در سیستم پروکاریوتی، به طور مستقیم امکان پذیر نیست. هدف از این مطالعه طراحی روشی بر مبنای آزمون الیزا برای بررسی اتصال سلولی پروتئینهای حاصل از ژن درمانی بود. مواد و روشها: به منظور هدفمندسازی ژن درمان گر mda-7، با روش مهندسی ژنتیک، توالی کد کننده پپتید rgd4c، که گرایش زیادی به اینتگرینهای سطحی سلولهای سرطانی دارد، را درست بعد از توالی پپتید نشانه مصنوعی و در ناحیه کد کننده انتهای آمین پروتئین تعبیه کردیم. سپس این cdna تغییر یافته و cdna بدون تغییر در ناقل بیانی یوکاریوتی pcdna3.1 همسانسازی شد. ناقلها در رده سلولی hek-293 ترانسفکت شدند. سپس میزان بیان mda-7 ترشح شده در محیط کشت سلولها با آزمون الیزا سنجیده شد. پس از همسان کردن غلظت پروتئینmda-7 و rgd.mda-7 در محیطهای کشت سلولهای ترانسفکت شده، از آنها به عنوان منبع این پروتئینها استفاده شد. کاهش غلظت محصول این ژنها دو ساعت پس از مجاورت با ردههای سلولی داری اینتگرین hepg2، m21 و فاقد اینتگرین saos-2 با روش الیزا بررسی و مقایسه شد. این آزمایش سه مرتبه به طور مستقل انجام گرفت. داده ها با استفاده از آزمون آماری تی تست تجزیه و تحلیل شد. یافته ها: بررسی آماری نتایج، حاکی از این بود که محصول ژن rgd.mda-7 نسبت به محصول ژن mda-7 جهت اتصال به سلول های دارای اینتگرین hepg2 و m21 به طور معنیداری گرایش بیشتری دارد، در حالی که جهت اتصال به رده سلولی فاقد اینتگرین saos-2 تفاوت معنی داری نداشتند. بحث: به نظر میرسد روش طراحی شده در این تحقیق، راهکار مناسبی جهت ارزیابی اتصال سلولی پروتئینها در کاربردهای ژن درمانی باشد.
Background & aim: One of the strategies to improve the therapeutic gene is targeting gene therapy. A method which can be considered, is adding code sequences peptide or protein with high tendency to target cells and secreting the therapeutic gene encodes a protein. However, evalu
مقالهکومشقاسم مسیبی، ghasem mosayebi molecular and medicine research center and department of immunology and microbiology, school of medicine, arak university of medical sciences, arak, iran1- دانشگاه علوم پزشکی اراک، دانشکده پزشکی و عضو مرکز تحقیقات پزشکی مولکولی، گروه میکروب شناسی و ایمنی شناسی حمید ابطحی، hameid abtahi molecular and medicine research center and department of immunology and microbiology, school of medicine, arak university of medical sciences, arak, iran1- دانشگاه علوم پزشکی اراک، دانشکده پزشکی و عضو مرکز تحقیقات پزشکی مولکولی، گروه میکروب شناسی و ایمنی شناسی علی قضاوی، ali ghazavi molecular and medicine research center and department of immunology and microbiology, school of medicine, arak university of medical sciences, arak, iran2- دانشگاه علوم پزشکی اراک، دانشکده پزشکی و عضو مرکز تحقیقات عفونی، گروه میکروب شناسی و ایمنی شناسی نادر زرین فر
سابقه و هدف: باکتری استرپتوکوک بتا همولیتیک گروه a اصلی ترین عامل عفونت های گوش و حلق و بینی می باشد. عدم درمان یا تاخیر در اقدامات درمانی، منجر به اختلالات جدی مانند تب روماتیسمی حاد و گلومرونفریت می شود. اندازه گیری آنتی بادی ضد استرپتولیزین- o به عنوان یک مارکر در تشخیص این عف
سابقه و هدف: باکتری استرپتوکوک بتا همولیتیک گروه A اصلی‌ترین عامل عفونت‌های گوش و حلق و بینی میباشد. عدم درمان یا تاخیر در اقدامات درمانی، منجر به اختلالات جدی مانند تب روماتیسمی حاد و گلومرونفریت میشود. اندازه‌گیری آنتی‌بادی ضد استرپتولیزین- O به عنوان یک مارکر در تشخیص این عف
مقدمه: تاثیر آنتی بادی ضداسپرم با میزان شیوع 26-6% در ایجاد ناباروری به خوبی شناخته شده است. لذا اندازه گیری آن در سرم و یا مایعات بیولوژیک مردان و زنان از اهمیت کلینیکی برخوردار است. امروزه یکی از مهمترین موضوعات مورد بحث در ناباروری ایمونولوژیک، طراحی روشی استاندارد جهت اندازه
بازار سرمایه از ارکان اصلی اقتصاد هر کشور است که از آن به عنوان ویترین و دماسنج اقتصاد یاد شده که بیانگر وضعیت اقتصاد کشور است. طراحی سبد سرمایه گذاری به عنوان یکی از مهم ترین مباحث مطرح در حوزه مالی همواره مورد توجه فعالان بازار سرمایه بوده است. این پژوهش ابتدا با شناسایی مهمتری
مقالهمهندسی مالی و مدیریت اوراق بهادارفریدون رهنمای رودپشتی، استاد دانشکده مدیریت و اقتصاد دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات ندا شیرین بیان، دانشجوی کارشناسی ارشد مهندسی مالی دانشگاه علم و فرهنگ
بازار سرمایه از ارکان اصلی اقتصاد هر کشور است که از آن به عنوان ویترین و دماسنج اقتصاد یاد شده که بیانگر وضعیت اقتصاد کشور است. طراحی سبد سرمایه گذاری به عنوان یکی از مهم ترین مباحث مطرح در حوزه مالی همواره مورد توجه فعالان بازار سرمایه بوده است. این پژوهش ابتدا با شناسایی مهمتری