هدف از این مطالعه تولید لنتی‏ویروس‏های بیان کننده mir-16 است. پس از ترانسداکشن، تغییرات ایجاد شده در سطوح بیانی این mirna و پروتئین هدف آن ارزیابی خواهد شد. مواد و روش‏ها: قطعه ژنی حاوی توالی پیش‏ساز mir-16 در پلاسمید لنتی ویروسی کلون شد. سازه نوترکیب همراه با پلاسمید‏های کد کننده پروتئین‏های ساختاری و پوششی ویروس توسط کلسیم-فسفات به رده سلولی 293t ترانسفکت شد. سوپ سلولی جمع‏آوری و ذرات ویروسی ...

ابزارهای گوناگونی به منظور انتقال ژن به سلول های یوکاریوتی توسعه یافته اند، در میان آن ها، کارایی ویروس های rna دار متعلق به خانواده رتروویریده به دلیل الحاق پایدار ژنوم خود در کروموزوم های میزبان بالاتر است. ویروس لوکمی موش (mlv) شناخته شده ترین عضو جنس اورتورتروویرینا از گامارتروویروس ها است. ناقل ویروسی بر پایه mlv تنها قادر به بیان ژن های خارجی در سلول های در حال تقسیم میتوز می باشد، که بیا...

مقدمه: روش های زیستی انتقال ژن یا استفاده از ناقل­های ویروسی، کاربرد گسترده ای در اهداف درمانی دارد. استفاده از ناقل های لنتی ویروسی با داشتن مزایایی چون توانایی آلوده­سازی سلول­های تقسیم شونده و غیر تقسیم شونده، توان حمل قطعه ی ژنی بزرگ و بیان پایدار ژن خارجی، ابزاری مناسب برای انتقال ژن در کاربردهای تحقیقاتی و درمانی به شمار می آیند. هدف از این پژوهش تولید یک ناقل لنتی ویروسی بر مبنای hiv-1(h...

وکتورهای مشتق شده از ویروس hiv تیپ 1 به طور گسترده ای برای ژن درمانی مورد استفاده قرار می گیرند، این وکتورها می توانند موجب بیان پایدار ژن مورد نظر، چه در سلولهایی که تقسیم می شوند و چه در سلولهایی که توانایی تقسیم را از دست داده اند، می شوند. هر چند تولید و تخلیص این وکتورها در تیتر بالا برای استفاده در آزمایش های in vivo دشوار می باشد. یکی از روشهای معمول برای تولید وکتورهای لنتی ویروسی، تران...

هدف: در پژوهش حاضر بیان ژن Cdc42 در سلول‌های Calu-6 مربوط به کارسینومای ریه با استفاده از سیستم مهاری shRNA کاهش یافته و اثرات این کاهش بر رشد و تکثیر سلولی بررسی شد.مواد و روش‌ها: به‫منظور کاهش بیان ژن Cdc42 از مکانیسم مهاری shRNA استفاده شد. سیستم‌ لنتی‌ویروسی برای رسانش shRNA اختصاصی ژن Cdc42 به سلول‌های Calu-6 انتخاب شد. لنتی‌ویروس‌های نوترکیب به‫کمک ...

سرطان معده (gc) از متداولترین سرطانها و دومین سرطان منجر به مرگ و میر انسانها در اثر سرطان در جهان است. mir-372 عملکردی شبه انکومیری دارد و از طریق ژن هدفش lats2 در انواع سرطانها باعث تهاجم و نیز عدم تنظیم چرخه سلولی، آپوپتوز و تکثیر سلولی می گردد. cd44 در سرطان معده مارکر سطح سلولی بنیادی سرطانی است و باعث تهاجم و متاستاز می گردد. در این مطالعه، بیان mir-372 با ترانسداکشن لنتی ویروس حامل آن در...

انتقال ژن خارجی به سلول ها با اهداف مختلف تحقیقاتی و درمانی و با بکارگیری سه روش فیزیکی، شیمیایی و زیستی صورت می گیرد. روش زیستی یا انتقال ژن با استفاده از ناقل های ویروسی یکی از پرکاربردترین روش های انتقال ژن در کارآزمایی هایی بالینی است. ناقل های لنتی ویروسی بر پایه جنس لنتی ویروس از خانواده رتروویریده تولید می شوند و ناقل های بر مبنای hiv-1 از پرکاربردترین این ناقل ها هستند. علت توجه به این ...

مقدمه: سرطان معده، از متداول ترین سرطان ها در جهان و دومین عامل مرگ انسان در اثر سرطان است. micrornas گروهی از rnaهای درون زاد کوچک غیر کد کننده با طول 23-21 نوکلئوتید هستند. افزایش بیان 372-mir در برخی سرطان ها، با کاهش بیان هدف آن (2lats) نقش انکومیری دارد. کاهش بیان 2lats منجر به عدم تنظیم چرخه ی سلولی، آپوپتوز و تکثیر سلولی می گردد. روش ها: در این مطالعه، با استفاده از ترانسداکشن لنتی ویروس...

مقدمه : سلول های بنیادی قادر به ایجاد هر نوع سلولی در بدن هستند. آنها می توانند تحت تأثیر بعضی شرایط فیزیولوژیک یا آزمایشگاهی به سلول هایی با عملکردهای اختصاصی مانند سلول های عضلانی قلب یا سلول های تولیدکننده انسولین در پانکراس وغیره تبدیل شوند. یکی از روش های تمایزی که امروزه مورد استفاده محققان قرار گرفته ترانسداکشن ژن های القا کننده تمایز، به داخل این سلول ها می باشد. ژن ترانسداکت شده باعث ف...

هدف: میکروrna ها، rna های غیر کد کننده‏ای است که به‏عنوان تنظیم کننده چندین فعالیت زیستی مثل متابولیسم، تکثیر و تنظیم سلولی عمل می‏کند. مطالعات اخیر نشان دهنده پتانسیل بالای این مولکول‏های کوچک در تمایز سلول‏های بنیادی به سلول‏های مشخص است. هدف از مطالعه حاضر ارزیابی اثر let-7f بر بیان ژن عامل هسته‏ای کبد (hnf4a) و عوامل خاص کبدی از جمله آلبومین، آلفا فیتوپروتئین، سیتوکراتین 18 و سیتوکراتین 19 ...