تشخیص توکسین حساس به حرارت باکتری اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک با استفاده از تکنیک pcr-elisa
چکیده
زمینه و هدف : اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک (etec) شایع ترین عامل اسهال باکتریایی در سراسر دنیا است. باکتری etec در سطح سلول های اپی تلیالی روده کوچک کلنیزه شده و بعد انتروتوکسین مقاوم به حرارت (st) و یا حساس به حرارت (lt) را ترشح می کند که با ورود به سلول ها باعث خروج آب و الکترولیت از سلول های اپی تلیالی روده شده و نهایتاً موجب اسهال می گردد. این مطالعه به منظور تشخیص توکسین lt باکتری اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک با استفاده از تکنیک pcr-elisa انجام شد. روش بررسی : در این مطالعه توصیفی با استفاده از آغازگرهای اختصاصی و با کمک روش pcr-elisa تشخیص توکسین lt باکتری etec انجام شد. در این روش محصولات نشاندار شده توسط دیگوکسیژنین، به کف ظرف های دارای استرپتواویدین منتقل و به کمک آنتی بادی ضد دیگوکسی ژنین کونژوگه شناسایی شدند. همچنین از کاوشگر داخلی نشاندار با بیوتین برای تایید محصولات pcr استفاده گردید. یافته ها : توکسین lt با کمک روش pcr-elisa شناسایی شد و میزان حساسیت آن 1.9 نانوگرم بود. همچنین این روش هیچگونه واکنش متقاطع با باکتری هایی از این خانواده نداشت. نتیجه گیری : روش pcr-elisa 100 برابر حساس تر از روش pcr معمولی بوده و به دلیل عدم نیاز به ژل آگارز و دستگاه الکتروفورز می تواند جایگزین مناسبی برای روش های قدیمی باشد.